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ACE抑制肽的活性筛选方法是什么?

时间:2020-05-15 14:52 作者:小分子肽 来源:北方基因 点击:

ACE抑制肽的活性筛选主要采用体外和体内两种测定方法。体外测定方法是通过加入一些血管紧张素Ⅰ的模拟底物,在一定条件下通过与ACE作用产生具有特异吸收特性的物质,通过对加入ACE抑制肽前后这种物质吸收特性的差异变化计算出其抑制的大小。
 
ACE抑制肽活性测定的关键是ACE活性的测定。ACE活性测定的方法有多种,早期的ACE活性测定以该酶的天然底物血管紧张素Ⅰ或缓激肽为底物,应用放射色谱法、比色法或放射免疫法分析,操作复杂,干扰多且底物昂贵。而目前多以人工合成的三肽作为酶底物进行分析。根据采用不同类型的分析检测仪器,大致分为分光光度计法、高效液相色谱法(HPLC)和高效毛细管电泳法等。
 
体外ACE抑制结果可能和体内的降压效果存在很大差异,因此一定要进行体内试验,尤其动物实验和临床试验是评价体内抗高血压肽效应的最有效的方式。动物实验一般选用原发性高血压大鼠(SHR)为动物模型,其遗传因素是发病的主要原因。通过测量SHR摄入ACE抑制剂前后的动脉收缩压变化来判断抑制效果。
 
常选用口服或注射方式给药。实验表明,食源性的许多抗高血压肽,特别是乳蛋白来源的抗高血压肽对SHR具有强的降压功能。动物实验因周期较长,对环境相对要求高,费用也较高,实验时应针对不同的实验样品选用不同的实验对象、给药方式、测定时间等。
 
临床试验研究人体内的降压作用是ACE抑制肽研究的重点,但目前的临床试验研究还很少,试验人群是血压超过标准血压的边界型或轻微患者,试验过程需进行正常的饮食、活动,通过测试服用ACE抑制肽前后的血压变化对其分析。
 
临床试验克服了人和动物生物反应性的差异,使其评价结果在人群中更具实用性。许多体外实验证实有ACE抑制效果的活性肽,经人体临床试验却无降压作用。同样,动物体内具有降压作用的ACE抑制肽在人体内的功能研究确实缺乏,因此临床试验将成为ACE抑制肽应用研究的必要过程。
 
总之,从以上的方法学研究,可以看出不同的ACE抑制肽活性测定方法均有各自的特点和适用范围,因而应根据具体情况分析,选用不同的筛选方法。简单的仪器分析可用于大规模的筛选技术,而精密仪器对设备、样品要求较高,适合于试验性研究及复筛工作。
 
体内测定方法,特别是动物实验和人体临床试验是最客观的评价方法,可确保筛选的目标产物更具可靠性及实用性。同时,通过建立体外实验和体内试验的相关性研究,建立多学科整合的复合筛选平台,可做好筛选方法的优化,既使筛选工作具有一定规模,又保证了筛选工作的有效。相信随着分子生物学、分子药理学等研究的不断深入,新的生物活性成分、功能基因、功能蛋白等作用新靶点的相继发现,将为建立新型降压筛选模型,研制出高效、安全的抗高血压肽相关产品提供新的思路和方向。
 
本文为科普文章,北方基因小分子肽为食字号食品,不具备药品、OTC等功能,如发现扩大宣传、虚假销售、广告用语等违法行为可在我司官网进行举报。

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